關于kromasil色譜柱的干貨知識！

　　高效液相色譜是20世紀60年代后期發展起來的分離分析技術，是現代分離測定的重要手段。問世以來，因其具有分離效能高、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析高沸點但不能氣化的熱不穩定生理活性物質的特點而被廣泛應用于生物化學、藥物及臨床分析。

　　kromasil色譜柱是高效液相色譜的心臟，在高效液相色譜儀的使用中，保持kromasil色譜柱的柱效、容量和滲透特性，延長柱子的使用壽命非常重要。盡管經過數十年的發展，出現了各種各樣的kromasil色譜柱，如制備柱、分析柱和各種微型柱，但kromasil色譜柱主體上仍由柱體、柱內填料和兩端的接頭組成。由于使用了高效填料，并不需要很長的柱長，常規分析柱多為15~30 cm的直型柱。由于高效液相kromasil色譜柱要承受系統高壓，所以柱體一般選用金屬材質。大部分kromasil色譜柱的接頭為通用尺寸，可互換使用。

　　kromasil色譜柱的正確使用

　　1、加裝保護柱：保護柱屬消耗品，經過一定次數的樣品分析(50~100次)后，出現柱壓顯著升高或峰形變壞或基線漂移時，應考慮更換保護柱。

　　2、過濾流動相和樣品 ：流動相通常由水或緩沖溶液與有機溶劑混合而成，原則上，所有經過kromasil色譜柱的流動相均應過濾，但在實際操作上應視具體情況而有所區別 。

　　3、凈化樣品 ：樣品中含有對kromasil色譜柱有損害的化學成分，如產生吸附的蛋白質、糖等有機分子和強吸附性物質,以及可能對柱填料產生破壞作用的基團離子。在進樣前應盡可能對樣品進行分離提純以除去多余雜質組分。

　　4、避免過高的柱壓 ：避免的方法為(1)柱壓過高時，盡可能采用較小的流速，以不超過柱zui大允許壓力的一半為宜。(2)當流速較大時，應采取流速梯度的辦法使流速分步到位。(3)使用手動進樣閥時，進樣閥的切換要盡可能的快。

　　5、注意溫度和酸堿度 ：一般以硅膠為基質的kromasil色譜柱zui高使用溫度不超過60℃，以低于40℃為宜，特別是在流動相pH接近使用限度時，更應降低使用溫度。目前的鍵合硅膠kromasil色譜柱標示的pH適用范圍可達2~10，但在實際使用時應避免的pH條件，特別是在偏堿性的條件(pH≥8)下使用。如必須要在的pH條件下使用時，可通過以下方法避免柱損害：(1)在泵和進樣閥之間加裝預柱(飽和柱)來飽和流動相；(2)降低使用溫度；(3)檢驗完畢后立即用與所使用的流動相互相混溶的“溫和溶劑”*清洗。